全自动核酸提取仪简介
核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。它可替代原来复杂的手动操作,仪器自动完成对细胞或组织的处理,分析提取出目标DNA/RNA。
目前市场上的核酸提取仪的提取原理主要分为两种:磁珠法和膜吸附法,其中磁珠法占市场主流地位。
磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。
全自动核酸提取仪——原理介绍
磁珠法核酸提取仪的基本原理概括总结
1. 抽吸法,也叫移液法,是通过固定磁珠、转移液体来实现核酸的提取,一般通过操作系统控制机械臂来实现转移。提取过程如下:
1) 裂解:在样品中加入裂解液,通过机械运动及加热实现反应液的混匀及充分反应,细胞裂解,释放核酸。
2) 吸附:在样品裂解液中加入磁珠,充分混匀,利用磁珠在高盐低PH值下对核酸具有很强亲和力的特点,吸附核酸,在外加磁场作用下,磁珠与溶液分离,利用吸头将液体移出弃至废液槽,吸头弃掉。
3) 洗涤:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗涤缓冲液,充分混匀,去除杂质,在外加磁场作用下,将液体移出。
4) 洗脱:撤去外加磁场,换用新吸头加入洗脱缓冲液,充分混匀,结合的核酸即与磁珠分离,从而得到纯化的核酸。
2. 磁棒法
磁棒法是通过固定液体,转移磁珠来实现核酸的分离,原理和过程与抽吸法的一样,不同的是磁珠和液体分离的方式。磁棒法是通过磁棒对磁珠的吸附将磁珠从废液中分离开,放入下一步的液体中,实现核酸的提取。
全自动核酸提取仪分类
根据仪器型号大小不同划分
1) 自动液体工作站
自动液体工作站是功能非常强大的设备,液体分液、吸液等自动完成,甚至能通过整合扩增、检测等功能,实现标本提取、扩增、检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不太适合常规实验室提取核酸,一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常大(至少96个,一般几百个)的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作,需要比较大的资金。
2) 小型自动核酸提取仪
小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊性来达到自动提取核酸的目的,可以在任何实验室得到应用。
全自动核酸提取仪的作用
伴随着分子生物学技术性的快速发展趋势,以核酸混种杂交、核酸增加及核酸编码序列剖析等为代表的分子诊断和检测设备的关键功效日益突显。试品前解决所耗费的时间段占全部解析流程的60%,而检验偏差的90%发生在前解决行业。核酸获取做为分子诊断试验重要的一步,其得到的核酸品质好坏立即危害到中下游分子生物学实验的成功与失败。